DH10Bac菌種產品及特點
DH10Bac用來生產用于真核細胞蛋白表達的重組桿狀病毒分子。DH10Bac菌株包含親本Bacmid的 bMON14272 和輔助質粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個mini-F復制子、卡那抗性基因、Tn7位點和lacZα-互補因子。att輔助質粒包含tns ABCD區域，該區域提供了 mini-Tn7從供體質粒插入親本Bacmid靶位點所需要的轉座蛋白。DH10Bac細胞中的 The φ80dlacZDM15基因的產物可以實現β-半乳糖苷酶的α-互補現象，用于重組bacmid的藍白斑篩選。DH10Bac含有卡那霉素和四環素抗性，而供體質粒pFastbac含有慶大霉素抗性。制備DH10Bac感受態細胞時需要在培養時添加卡那霉素和四環素，而在制備桿粒時需要使用卡那霉素，四環素，慶大霉素的三抗平板。其基因型如下：
F-mcr A Δ(mrr -hsd RMS-mcr BC) φ80lac ZΔM15Δlac X74 rec A1 end A1 ara D139 Δ(ara ,l e u ) 7 6 9 7 g a l U g a l K λ - r p s L n u p G /pMON14272/pMON7124
低溫運輸，-80℃保存，有效期一年。
DH10Bac菌種細菌的培養和收集：
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
DH10Bac菌種質粒DNA少量快速提取：
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
DH10Bac菌種（一）、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。
2、棄上清，將管倒置于衛生紙上幾分鐘，使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY100103裂殖酵母化學感受態細胞制備試劑盒20次(A)|20次(B)XY81109酵母化學感受態細胞制備試劑盒20次(A)|20次(B)XY81201酵母電轉感受態細胞制備試劑盒20次XY100502高效E.coli感受態細胞制備試劑盒20次XY81024DH5α感受態細胞0.1mL×10XY81221HB101感受態細胞0.1mL×10XY90207JM109感受態細胞0.1mL×10XY90208SURE感受態細胞0.1mL×10XY80701TG1感受態細胞0.1mL×10XY80806Top10感受態細胞0.1mL×10XY90504XL1-Blue感受態細胞0.1mL×10XY100818MDS 42rec A trf A菌種1mLXY100819MDS 42T7lac 菌種1mLXY70602DNA快速連接試劑盒30次|100次XY90801一站式TA克隆試劑盒20次(A)|20次(B)XY131126一站式平末端克隆試劑盒20次XY130827小RNA克隆試劑盒10次XY130681通用 miRNA 克隆接頭0.83nmolXY51101常態轉化液20次XY50901菌落PCR試劑盒2.050次XY100884IPTG干粉2.5gXY80909IPTG溶液1.5mLXY100885X-Gal干粉0.5g
