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BL21-CodonPlus-RP菌種產品及特點
BL21-CodonPlu系列菌株有助于解決密碼子偏倚性問題,細胞中帶有大腸桿菌稀有tRNA的額外基因拷貝,從而可以高水平表達許多在常規大腸桿菌宿主中難以表達或不能表達的蛋白。
BL21-CodonPlus–RP細胞帶有額外拷貝的argU和proL tRNA基因。
其基因型如下:
F- omp T hsd S(rB-mB-)dcm + Tetr galend A Hte [argU proL Camr]
低溫運輸,-80℃保存,有效期一年。
BL21-CodonPlus-RP菌種細菌的培養和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
BL21-CodonPlus-RP菌種質粒DNA少量快速提取:
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
BL21-CodonPlus-RP菌種(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY111107DNA電泳分子量標準(2)50次XY90602DNA電泳分子量標準(3)50次XY120654Southern專用DNA Marker20次(A)|20次(B)XY90101大片段DNA分子量標準50μgXY130960超螺旋DNA分子量標準100uLXY70605miRNA電泳分子量標準30次XY3120微量RNA助沉劑0.1mLXY131187Acryl DNA助沉劑1mLXY131188彩色Acryl DNA助沉劑1gXY131189分子生物學級糖原干粉1gXY131190分子生物學級糖原溶液1mLXY50903微量核酸沉淀劑10mLXY60402超快非醇核酸沉淀劑30次|100次XY110801核酸濃縮劑30mLXY80204柱式RNA純化試劑盒50次XY90211低載量PCR片段純化試劑盒50次|100次XY90212高載量PCR片段純化試劑盒50次|100次XY100201海量PCR片段純化試劑盒5次XY8091996孔板PCR片段純化回收試劑盒(離心法)1次|5次XY60202柱式DNA膠回收試劑盒50次|100次XY90506膠回收及PCR片段純化兩用試劑盒50次|100次XY60706一管式DNA膠回收試劑30次|100次