AD494(DE3)菌種產品及特點

AD494菌株來源于K12菌，有助于蛋白的形成正確的三維結構。AD494菌株含有thioredoxin reductase (TrxB)基因突變，有利于細菌胞內的二硫鍵形成，能夠幫助蛋白形成正確的三維折疊，形成有功能活力的蛋白。AD494菌株中的thioredoxinreductase (TrxB)突變具有卡那霉素抗性，因此該宿主菌只能用于氨芐或者其他非卡那霉素抗性的質粒，進行基因蛋白表達。DE3是溶源性的 λDE3, 所以帶有T7 RNA聚合酶的染色體拷貝。該菌株適用于pET系列載體，及其他T7啟動子系列載體。能夠利用IPTG直接進行蛋白的誘導表達。

低溫運輸，-80℃保存，有效期一年。

AD494(DE3)菌種細菌的培養和收集：

將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。

AD494(DE3)菌種質粒DNA少量快速提取：

質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　AD494(DE3)菌種（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。

　　8、取20ml進行電泳檢查。

XY101002KOD DNA聚合酶250UXY131037Tfl DNA聚合酶100UXY130430E.coli DNA聚合酶 Ι500UXY100937φ29 DNA聚合酶250UXY120411T4 DNA 聚合酶50UXY130618T7 DNA 聚合酶(未修飾)300UXY130602Vent DNA 聚合酶100UXY131195Deep Vent DNA 聚合酶100UXY131182Sulfolobus DNA 聚合酶 IV100UXY130612Bst DNA 聚合酶，全長500UXY100209Bst DNA聚合酶，大片段800UXY130616Bsu DNA 聚合酶，大片段200UXY1306139°Nm DNA聚合酶200UXY130614Therminator DNA 聚合酶200UXY131196Therminator II DNA 聚合酶100UXY130617Therminator γ DNA 聚合酶200UXY60905MMLV逆轉錄酶10000U|50000UXY131209MMLV逆轉錄酶(H-)1000UXY131210耐熱型MMLV逆轉錄酶(H-)1000UXY90502AMV逆轉錄酶200UXY120312末端脫氧核苷轉移酶500UXY120509Poly(A)聚合酶20UXY130620Poly(U)聚合酶60UXY131124多核苷酸磷酸化酶100mg

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