EGY48 酵母感受態細胞產品及特點

EGY48 感受態細胞是實驗室常用酵母雙雜用菌株，MATα 型， 可轉化質粒或mating 操作。Transformation marker為: his3, trp1, ura3 ， 報告基因為：LEU2 。本產品經PGBKT7 質粒檢測轉化效率為104cfu/μg DNA。

其基因型如下：

MAT α, ura 3, his 3, trp 1, Lex Aop(x6)-LEU2

干冰運輸，-80℃保存，有效期一年。

EGY48 酵母感受態細胞細菌的培養和收集：

將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。

EGY48 酵母感受態細胞質粒DNA少量快速提取：

質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　EGY48 酵母感受態細胞（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。

　　8、取20ml進行電泳檢查。

XY100912長效期SDS-PAGE電泳液(干粉)20L(A)XY81205一站式Tricine-SDS-PAGE套裝30次XY81225Tricine-SDS-PAGE配膠液250mL|1000mLXY81213Tricine-SDS-PAGE上樣液1mL|5mLXY81214Tricine-SDS-PAGE陽極電泳液(干粉)10L|50LXY81226Tricine-SDS-PAGE陰極電泳液(干粉)10L|50LXY81212一站式蛋白非變性PAGE套裝30次(A)|30次(B)|30次(C)XY100828高pH緩沖液套裝30次XY100829中pH緩沖液套裝30次XY100830低pH緩沖液套裝30次XY70102蛋白質電泳分子量標準15次(A)|20次(B)|10次(C)XY70704預染蛋白質電泳分子量標準10次(A)|10次(B)XY90402蛋白膠微量回收試劑盒50次XY90403蛋白膠中量回收試劑盒5次XY80812考馬斯亮藍染液250mLXY61204一步式PAGE染液10次XY111203綠如藍蛋白染液250次

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