中喬新舟朋友圈集贊活動：49元領(lǐng)無血清細胞凍存液
從克隆的但是表型各異的MC3T3-E1細胞系中分離出一系列亞克隆。 從含抗壞血酸培養(yǎng)基生長的成骨細胞中選擇高或低成骨細胞分化、礦化的亞克隆。 MC3T3亞克隆4（ATCC CRL-2593）和MC3T3亞克隆14（ATCC CRL-2594）在抗壞血酸和3到4mM無機磷酸鹽中生長表現(xiàn)出高水平的成骨細胞分化。 它們10天后形成一個礦化良好的細胞外基質(zhì)（ECM）。
MC3T3亞克隆24（ATCC CRL-2595）和MC3T3亞克隆30（ATCC CRL-2596）在抗壞血酸中生長表現(xiàn)出很差的成骨細胞分化。 不形成ECM， 可以作為亞克隆4和14的陰性對照。 礦化的亞克隆選擇的表達作為成骨細胞標記的mRNA，及唾液酸糖蛋白（BSP），骨鈣素（OCN），和甲狀旁腺激素/甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白受體的mRNA。 高或者低的分化潛能的亞克隆在培養(yǎng)中生產(chǎn)出相似數(shù)量的膠原質(zhì)，表達可比較的基本水平的mRNA編碼Osf2/Cbfa1，一種成骨細胞相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子。
細胞的培養(yǎng)
培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基：MEM α +10%胎牛血清+1%雙抗（注意：MEM α 不含VC組分）
推薦傳代比例：1：4-1：8
換液頻率： 2-3次/周 2-3次/周
培養(yǎng)條件： 5% CO₂，37°C
2 成骨誘導分化實驗步驟
①由于誘導時間比較長，建議提前使用明膠包被6孔板。（注意此處是為了減少誘導過程細胞漂起、不貼壁）
②建議取第3~5代、純度達90%以上、狀態(tài)良好的MC3T3-E1細胞，將其消化下來，離心收集，使用MC3T3-E1細胞完全培養(yǎng)基調(diào)整細胞密度為1~5×105個cell/mL，均勻鋪于6孔板中，每孔2mL，置于37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（注意：此處細胞密度及培養(yǎng)液體積以6孔板為例，若為其它培養(yǎng)器皿，請根據(jù)實際情況調(diào)整細胞密度及培養(yǎng)液體積。）
③待細胞匯合度達80%~100%時，即可進行誘導分化。
④小心吸棄細胞培養(yǎng)上清，沿孔壁緩慢加入提前配制好的誘導分化完全培養(yǎng)基，每孔2mL，置于37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（注意：完全培養(yǎng)基加入細胞前需提前置于37℃預熱。）
⑤每2day換用新鮮的誘導分化完全培養(yǎng)基。由于細胞量比較大，培養(yǎng)液顏色會偏黃色屬于正常現(xiàn)象，及時換液即可。（注意：完全培養(yǎng)基加入細胞前需提前置于37℃預熱。）
⑥細胞誘導3周后，即可進行茜素紅染色鑒定。
⑦誘導過程中，已經(jīng)成骨的MC3T3-E1細胞會變褐色和變圓。
3.鑒定方法
A.茜素紅染色分析
① 細胞誘導分化結(jié)束后，小心吸棄細胞培養(yǎng)上清，1×PBS潤洗1~2次。每孔加入1mL細胞固定液，室溫固定15-30 min。（注意：操作一定要輕柔。）
② 吸棄細胞固定液，1×PBS潤洗2次。沿孔壁緩慢加入茜素紅染色液，每孔1mL，室溫染色30min。（注意：染色液底部可能會有沉淀，吸取時盡量不要觸及底部。若細胞染色后有沉淀，1×PBS洗去即可。）
③ 吸出染色液，1×PBS潤洗，去掉浮色。顯微鏡下觀察細胞染色效果，鈣鹽呈較深的橙紅色。
④光鏡拍照建議留一些pbs,減少光圈的出現(xiàn)，以便呈現(xiàn)更好的成骨效果。
B.成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子
礦化亞克隆選擇性表達成骨細胞標志物、骨唾液蛋白 （BSP）、骨鈣素 （OCN） 堿性磷酸酶（ALP） 骨橋蛋白（OPN）、I型膠原（COL I）和甲狀旁腺激素 （PTH）/甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白 （PTHrP） 受體的 mRNA。相關(guān)引物序列如下 
參考文獻
標題：Inhibiting Osteolytic Breast Cancer Bone Metastasis by Bone-Targeted Nanoagent via Remodeling the Bone Tumor Microenvironment Combined with NIR-II Photothermal Therapy
作者：Yaoxun Zeng, Zhenxing Pan, Jiongpeng Yuan, Yuqiong Song, Zhenzhen Feng, Zefeng Chen, Zhaoyi Ye, Yushan Li, Ying Bao, Zhili Ran, Xinyi Li, Huiling Ye, Kun Zhang, Xujie Liu, Yan He
期刊：Small
DOI：First published: 21 May 2023
影響因子 ：15.153
引用產(chǎn)品：ZQ0118，ZQ0095，ZQ0098
網(wǎng)址：https://doi.org/10.1002/smll.202301003
標題：Amino-Functionalized Zirconium-Based Metal–Organic Frameworks as Bifunctional Nanomaterials to Treat Bone Tumors and Promote Osteogenesis.(2023-11-09)
作者：Jongpeng Yuan,Xujie Liu
期刊：ACS Applied Materials & Interfaces
DOI: 10.1021/acsami.3c11787
影響因子 ：9.5
引用產(chǎn)品：MC3T3-E1, MNNG/HOS and MDA-MB-231 cell
網(wǎng)址：https://pubs.acs.org/doi/full/10.1021/acsami.3c11787
茜紅素染色結(jié)果參考圖
相關(guān)產(chǎn)品推薦
1、 MEMα 基礎(chǔ)培養(yǎng)基（ ZQ-700-VC-FREE ）
2、MEMα 完全培養(yǎng)基（ZQ-720-VCF ）
3、MC3T3-E1細胞成骨誘導分化試劑盒（CSP080）
49元領(lǐng)細胞凍存液啦！
該無血清凍存液為即用型產(chǎn)品，配方成分明確，不含動物來源性蛋白，不含血清。不僅降低了各類細菌、病毒、支原體等污染風險，保證凍存細胞的安全，而且減少外源性蛋白對細胞正常生長和分化的影響此外，該凍存液中含有 DMS0、葡萄糖等各種細胞營養(yǎng)成分，可以有效提高細胞存活率和活力，適用于各種動物細胞(細胞系和原代細胞)的凍存。具有以下幾個優(yōu)點：
1、不含動物源成分，病毒、霉菌和支原體等污染可能性低，各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性
2、成分明確，無批次差異
3、可直接存放于-80°C冰箱凍存，無需經(jīng)過費時的程序降溫過程(省時、省力、省錢)
4、獨特配方有效提高細胞凍存存活率及復蘇率
5、即用型，無需現(xiàn)配，即開即用
6、可微量，原位凍存，例如雜交瘤細胞的凍存省時高效
7、通用型，適用于凍存各種細胞系，原代細胞
1、活動日期：2024年3月1日-2024年3月31日
2、活動對象：僅限終端客戶參與活動
3、兌現(xiàn)日期：2024年4月15日（由公司統(tǒng)一配送到當?shù)卮恚?br /> 4、領(lǐng)取地點：各區(qū)域代理
5、活動詳情：如對本活動有疑問，請關(guān)注中喬新舟公眾號與我們聯(lián)系
6、本活動最終解釋權(quán)歸中喬新舟所有
MC3T3亞克隆24（ATCC CRL-2595）和MC3T3亞克隆30（ATCC CRL-2596）在抗壞血酸中生長表現(xiàn)出很差的成骨細胞分化。 不形成ECM， 可以作為亞克隆4和14的陰性對照。 礦化的亞克隆選擇的表達作為成骨細胞標記的mRNA，及唾液酸糖蛋白（BSP），骨鈣素（OCN），和甲狀旁腺激素/甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白受體的mRNA。 高或者低的分化潛能的亞克隆在培養(yǎng)中生產(chǎn)出相似數(shù)量的膠原質(zhì)，表達可比較的基本水平的mRNA編碼Osf2/Cbfa1，一種成骨細胞相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子。
本期為大家總結(jié)了，在誘導MC3T3-E1細胞過程中的注意事項和具體操作步驟。
細胞的培養(yǎng)
培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基：MEM α +10%胎牛血清+1%雙抗（注意：MEM α 不含VC組分）
推薦傳代比例：1：4-1：8
換液頻率： 2-3次/周 2-3次/周
培養(yǎng)條件： 5% CO₂，37°C
2 成骨誘導分化實驗步驟
①由于誘導時間比較長，建議提前使用明膠包被6孔板。（注意此處是為了減少誘導過程細胞漂起、不貼壁）
②建議取第3~5代、純度達90%以上、狀態(tài)良好的MC3T3-E1細胞，將其消化下來，離心收集，使用MC3T3-E1細胞完全培養(yǎng)基調(diào)整細胞密度為1~5×105個cell/mL，均勻鋪于6孔板中，每孔2mL，置于37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（注意：此處細胞密度及培養(yǎng)液體積以6孔板為例，若為其它培養(yǎng)器皿，請根據(jù)實際情況調(diào)整細胞密度及培養(yǎng)液體積。）
③待細胞匯合度達80%~100%時，即可進行誘導分化。
④小心吸棄細胞培養(yǎng)上清，沿孔壁緩慢加入提前配制好的誘導分化完全培養(yǎng)基，每孔2mL，置于37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（注意：完全培養(yǎng)基加入細胞前需提前置于37℃預熱。）
⑤每2day換用新鮮的誘導分化完全培養(yǎng)基。由于細胞量比較大，培養(yǎng)液顏色會偏黃色屬于正常現(xiàn)象，及時換液即可。（注意：完全培養(yǎng)基加入細胞前需提前置于37℃預熱。）
⑥細胞誘導3周后，即可進行茜素紅染色鑒定。
⑦誘導過程中，已經(jīng)成骨的MC3T3-E1細胞會變褐色和變圓。
3.鑒定方法
A.茜素紅染色分析
① 細胞誘導分化結(jié)束后，小心吸棄細胞培養(yǎng)上清，1×PBS潤洗1~2次。每孔加入1mL細胞固定液，室溫固定15-30 min。（注意：操作一定要輕柔。）
② 吸棄細胞固定液，1×PBS潤洗2次。沿孔壁緩慢加入茜素紅染色液，每孔1mL，室溫染色30min。（注意：染色液底部可能會有沉淀，吸取時盡量不要觸及底部。若細胞染色后有沉淀，1×PBS洗去即可。）
③ 吸出染色液，1×PBS潤洗，去掉浮色。顯微鏡下觀察細胞染色效果，鈣鹽呈較深的橙紅色。
④光鏡拍照建議留一些pbs,減少光圈的出現(xiàn)，以便呈現(xiàn)更好的成骨效果。
B.成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子
礦化亞克隆選擇性表達成骨細胞標志物、骨唾液蛋白 （BSP）、骨鈣素 （OCN） 堿性磷酸酶（ALP） 骨橋蛋白（OPN）、I型膠原（COL I）和甲狀旁腺激素 （PTH）/甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白 （PTHrP） 受體的 mRNA。相關(guān)引物序列如下
參考文獻
標題：Inhibiting Osteolytic Breast Cancer Bone Metastasis by Bone-Targeted Nanoagent via Remodeling the Bone Tumor Microenvironment Combined with NIR-II Photothermal Therapy
作者：Yaoxun Zeng, Zhenxing Pan, Jiongpeng Yuan, Yuqiong Song, Zhenzhen Feng, Zefeng Chen, Zhaoyi Ye, Yushan Li, Ying Bao, Zhili Ran, Xinyi Li, Huiling Ye, Kun Zhang, Xujie Liu, Yan He
期刊：Small
DOI：First published: 21 May 2023
影響因子 ：15.153
引用產(chǎn)品：ZQ0118，ZQ0095，ZQ0098
網(wǎng)址：https://doi.org/10.1002/smll.202301003
標題：Amino-Functionalized Zirconium-Based Metal–Organic Frameworks as Bifunctional Nanomaterials to Treat Bone Tumors and Promote Osteogenesis.(2023-11-09)
作者：Jongpeng Yuan,Xujie Liu
期刊：ACS Applied Materials & Interfaces
DOI: 10.1021/acsami.3c11787
影響因子 ：9.5
引用產(chǎn)品：MC3T3-E1, MNNG/HOS and MDA-MB-231 cell
網(wǎng)址：https://pubs.acs.org/doi/full/10.1021/acsami.3c11787
茜紅素染色結(jié)果參考圖
相關(guān)產(chǎn)品推薦
1、 MEMα 基礎(chǔ)培養(yǎng)基（ ZQ-700-VC-FREE ）
2、MEMα 完全培養(yǎng)基（ZQ-720-VCF ）
3、MC3T3-E1細胞成骨誘導分化試劑盒（CSP080）
49元領(lǐng)細胞凍存液啦！
該無血清凍存液為即用型產(chǎn)品，配方成分明確，不含動物來源性蛋白，不含血清。不僅降低了各類細菌、病毒、支原體等污染風險，保證凍存細胞的安全，而且減少外源性蛋白對細胞正常生長和分化的影響此外，該凍存液中含有 DMS0、葡萄糖等各種細胞營養(yǎng)成分，可以有效提高細胞存活率和活力，適用于各種動物細胞(細胞系和原代細胞)的凍存。具有以下幾個優(yōu)點：
1、不含動物源成分，病毒、霉菌和支原體等污染可能性低，各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性
2、成分明確，無批次差異
3、可直接存放于-80°C冰箱凍存，無需經(jīng)過費時的程序降溫過程(省時、省力、省錢)
4、獨特配方有效提高細胞凍存存活率及復蘇率
5、即用型，無需現(xiàn)配，即開即用
6、可微量，原位凍存，例如雜交瘤細胞的凍存省時高效
7、通用型，適用于凍存各種細胞系，原代細胞
活動說明
轉(zhuǎn)發(fā)本文到朋友圈，集贊滿49個，即可49元獲得無血清細胞凍存液1瓶（規(guī)格50ML 貨號：CSP042）
轉(zhuǎn)發(fā)本文到朋友圈，集贊滿49個，即可49元獲得無血清細胞凍存液1瓶（規(guī)格50ML 貨號：CSP042）
1、活動日期：2024年3月1日-2024年3月31日
2、活動對象：僅限終端客戶參與活動
3、兌現(xiàn)日期：2024年4月15日（由公司統(tǒng)一配送到當?shù)卮恚?br /> 4、領(lǐng)取地點：各區(qū)域代理
5、活動詳情：如對本活動有疑問，請關(guān)注中喬新舟公眾號與我們聯(lián)系
6、本活動最終解釋權(quán)歸中喬新舟所有
- IKA經(jīng)濟型加熱恒溫水浴ICC 100 lite eco 18促銷中
- 圣戈班囊式空氣過濾器工業(yè)級清倉特惠活動開始啦
- 尚睿生物推出“會員專享套餐”，加盟會員試劑免費用
- 德國IKA特惠活動：RV3旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀立享含稅促銷價
- 上海悌可光電推出顯微鏡相機以舊換新服務
- 易科泰Specim AFX系列高光譜成像限時優(yōu)惠活動開始啦
- 細胞檢測試劑盒免費送，反饋即享100%京東卡好禮！
- 英國Lovibond原裝進口耗材大降價，掃碼搶購！
- 周年福利：IKA G-L微量臺式離心機買1送1，超長質(zhì)保
- 玩游戲贏積分，小貝智選商城和你一起有獎消消樂
- 北京元森凱德推出NGI智能洗盤促銷及免費校驗證活動
- 特價促銷：蘭博利德免疫沉淀試劑盒買贈活動開始啦
- 開學季，科研福利到!本生生物提取試劑盒限時特惠
- MD官方商城上線52款試劑耗材新品，限時好禮相送
- 賽默飛開工返校季促銷：高品質(zhì)細胞培養(yǎng)耗材尊享價
- GelNEST™基質(zhì)膠助力應對貿(mào)易壁壘下的科研不確定性
- 拉曼技術(shù)在未來醫(yī)學中的應用醫(yī)工融合沙龍成功舉行
- 博鷺騰試劑2025首次大促銷開啟，超多優(yōu)惠等你來
- 中喬新舟開學優(yōu)惠:細胞實驗套裝980元,培養(yǎng)基折扣等
- 中喬新舟限時促銷：買細胞就送支原體檢測試劑盒
- 華威中儀試劑盒年末限時優(yōu)惠來襲，儲值享好禮
- 美德聲推出新品重組細胞系用于生產(chǎn)單克隆血型試劑
- 百螢小麥胚芽凝集素探針染料8折優(yōu)惠，買即贈鼠標墊
- 上海惠誠生物成為安普未來恒溫擴增試劑盒代理商
- 雙11科研狂歡促銷，逐典攜手埃澤思下單滿額雙重好禮
- MCE 第三屆細胞攝影大賽圓滿落幕，評選結(jié)果公布
- MCE教師節(jié)直播:細胞凋亡的機制、標志物與檢測方法
- 百螢SO Green 520WS單線態(tài)氧探針促銷，買即送京東卡
- 中喬新舟開學特惠活動：細胞系5折無需捆綁輕松購
- 上海逐典生物參展2024 IDC第三屆新藥研發(fā)影響力大會
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網(wǎng) 電話：021-64166852;13621656896 E-mail：info@bio-equip.com