2009年H1N1的大規模傳播,賽默飛世爾為河北省多個疾病控制中心(CDC)提供基于Thermo Scientific KingFisher 技術的快速和高通量檢測甲型H1N1流感病毒的解決方案,成功完成H1N1的檢測和監控工作,并以KingFIsher技術為核心為各地CDC建立了快速高通量的全自動化疫病監測系統。為了進一步拓展KingFisher 技術在疾病控制領域的應用,將Thermo Scientific KingFisher Flex磁珠提取平臺在CDC日常檢測項目中發揮更多的作用,賽默飛世爾科技聯合北京博奧恒信生物科技有限公司于6月30日至7月2日在石家莊成功舉辦了全自動磁珠提取系統Thermo Scientific KingFisher Flex在疾控系統高級應用培訓課程,河北省多個CDC急傳科和微生物室的客戶參與本次培訓。
本次高級培訓課程專注于KingFisher Flex在疾病控制中心對DNA/RNA病毒的檢測和CDC系統常檢的食源性致病菌的檢測,首先由賽默飛世爾科技 技術應用專家歐陽志荃介紹了KingFisher系統的原理以及在疾病控制中心的各種應用;隨后賽默飛世爾客戶技術應用經理彭力博士介紹了BindIt軟件的系統應用,并實地展開了兩個方面的檢測實驗:
1、 兒童手足口病毒的檢測實驗:目前各疾控中心嚴格監控手足口病毒在兒童和幼兒園的傳播,本次實驗標本為兒童的咽拭子和糞便標本,取50ul的咽拭子樣本和經離心處理的糞便標本上清液,聯合Ambion的MagMax 96 Viral RNA kit和GeneMag的Virus RNA提取試劑盒,經KingFisher Flex儀器,約18分鐘提取96人份標本的RNA,提取得到的RNA經手足口病毒特異引物熒光定量PCR后,判定結果。整個提取過程包括加樣和上機時間約30分鐘,連同熒光定量的時間,在約4小時完成96人份手足口病毒標本的檢測。本次實驗實驗一共測試了11人份標本,22個樣本,實驗結果顯示經 KingFisher Flex方法提取 標本熒光定量結果與手工的離心柱方法結果一致,但提取時間縮短了不少。由于KingFisher Flex具備開放的試劑平臺,因此本次實驗采用了兩家試劑公司的病毒RNA磁珠提取試劑盒,取得一致的結果,充分驗證了KingFisher Flex的靈活性和試劑的開放性,為客戶日常檢測和應急狀況下提供試劑的保證,KingFisher Flex系統在CDC系統病毒檢測方法具備以下幾個特點:
●高通量:KingFisher Flex節省時間,10-40分鐘提取96個樣本,每天最多可處理1600個樣本
●高靈活性:可以用于 24和96 的微孔板,24孔用于大體積標本的提取,96孔用于常規提取
●高穩定性:提取核酸產量高,質量好 ,可重復性好
●高可靠性:無交叉污染,有大量的經確認的實驗程序
●高選擇性:開放的試劑系統,任何商業化的磁珠試劑盒均可使用
Thermo Scientific提供的KingFisher Flex快速高通量檢測病毒整體方案
利用KingFisher Felx從咽拭子和糞便標本中提取手足口病毒的結果,左圖為典型EV-71陽性標本,右圖為22個樣本檢測總結果
2、 食品中提取中提取致病性大腸桿菌O157:H7的提取:利用免疫磁珠方法,選用Dynal的E.coliO157:H7特異性免疫磁珠,聯合 KingFisher Flex系統,通過下圖3顯示的實驗流程,可以將E.coliO157:H7細菌的鑒定時間由傳統方法的一周縮短到1-2天,并可以用于CDC常規檢測的四種致病菌的待檢測,包括大腸桿菌O157 (E.coli O 157);李斯特菌(Listeria);沙門氏菌(Salmonella)和軍團菌(Legionella)等,并具備以下優點:
●省時省力: 10-24小時完成檢測流程,極大減少手工勞作的強度和時間;
●高靈敏度: 10CFU/25mg E.coli O157樣品: 檢測成功率 100%;1CFU/25mg E.coli O157樣品: 可檢出;
●高效率:將提取靈敏度提高10-100 倍;
●可靠性:假陰性率 ~2%,手工提取的假陰性率大于25%,大大提高了檢出率.
KingFisher Flex方法從食物樣本中提取四種CDC常檢的致病細菌實驗流程圖
除此以外,本次課程中,賽默飛世爾科技的技術銷售專家俞立超介紹了掃描式全波長多功能讀數儀Varioskan Flash在CDC的應用,介紹了具體的檢測方法,尤其是關于麻疹ELISA檢測的實驗設計和結果分析計算部分,獲得大家的一致好評。本次課程中,每位客戶都親自參與到實驗中,并積極提問,探討KingFisher Flex在疾控系統中的各種應用,在試劑和儀器控制等方面提出很多有建設性的建議和展望,在結束晚宴中,特意安排了抽獎活動,整個培訓在輕松愉快的氣氛中圓滿結束。
Thermo Scientific KingFisher Flex全自動磁珠提取純化系統
Thermo Scientific Varioskan Flash全波長掃描式多功能讀數儀
關于賽默飛世爾科技
賽默飛世爾科技(紐約證交所代碼:TMO)是全球科學服務領域的領導者,致力于幫助客戶使世界更健康、更清潔、更安全。公司年度營收達到100多億美元,擁有員工35,000多人服務客戶。這些客戶包括:醫藥和生物技術公司、醫院和臨床診斷實驗室、大學、科研院所和政府機構以及環境與工業過程控制裝備制造商等。公司借助 Thermo Scientific 和 Fisher Scientific 這兩大品牌,幫助客戶解決從常規測試到復雜的研發項目中所面臨的各種分析方面的挑戰。Thermo Scientific向客戶提供了一整套完整的高端分析儀器、實驗室設備、軟件、服務、耗材和試劑,以實現實驗室工作流程綜合解決方案。Fisher Scientific 為衛生保健、科學研究,安全和教育領域的客戶提供完整的實驗室裝備、化學藥品、供應品和服務的組合。賽默飛世爾科技將努力為客戶提供最為便捷的采購方案,為科研的飛速發展不斷地改進工藝技術,并提升客戶價值,幫助股東提高收益,還為員工創造良好的發展空間。欲了解更多信息,請瀏覽公司網站www.thermofisher.com: 或中文網站www.thermo.com.cn ;www.fishersci.com.cn 。