美國ANASPEC公司在成功地開發和上市具有專利保護的(硫醇)Thiol定量測定試劑盒后,應許多客戶的要求,該公司又開發了高靈敏度的總谷胱甘肽(GSH)檢測試劑盒。
谷胱甘肽檢測試劑盒提供了一種簡便的高度靈敏熒光檢測方法,用來測定總谷胱甘肽濃度(GSH+GSSG)。其原理是應用了一種全新的熒光試劑,與還原型的GSH接觸和反應后,釋放出熒光,在波長490/520 nm可用熒光檢測儀測出。在谷胱甘肽還原酶作用下,氧化型谷胱甘肽會轉變為還原型谷胱甘肽,因此可對總谷胱甘肽水平進行定量測定。本試劑盒靈敏度線性范圍是0.2-100 mM 谷胱甘肽,在試劑盒中包括5-磺基水楊酸(Sulfosalicyclic acid)以去除生物樣品中的蛋白質。
同時ANASPEC還開發了檢測總谷胱甘肽水平的顯色反應試劑盒,試劑盒中含有Eliman氏試劑 [5, 5?dithiobis (2-nitrobenzoic acid)]。Eliman氏試劑與谷胱甘肽接觸反應后會釋放出有顏色的產物,用ELISA檢測儀在415 nm波長處可以測出。顯色反應的強度與谷胱甘肽濃度成正比。
谷胱甘肽在動物、植物和原蟲是主要的硫醇復合物,谷胱甘肽在細胞抵抗氧化物的損害中起著關鍵作用,是谷胱甘肽轉移酶和谷胱甘肽過氧化酶的共同因子。在維持細胞內氧化還原狀態,氨基酸轉移和線粒體呼吸中谷胱甘肽也起著作用。總谷胱甘肽包括還原型和氧化型兩種形式,谷胱甘肽氧化后就轉變為GSSG。由于GSSG的數量增加,GSH/GSSG比例就會下降,檢測GSH和GSSG的濃度以及它們的分子濃度比例,是細胞的功能和氧化物損害水平的重要指標。
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